Ham’s Nutrient Mixtures
Ham’s Nutrient Mixtures bezeichnet in der Zellkultur ein flüssiges Zellkulturmedium, das zur Kultur von Säugetierzellen verwendet wird.[1] Insbesondere werden Ham’s F-10 und Ham’s F-12 verwendet.
Eigenschaften Bearbeiten
Ursprünglich wurde Ham’s F-10 für die serumfreie Kultur von CHO-Zellen, HeLa-Zellen und Maus-L-Zellen entwickelt.[2] Er ist teilweise Carbonat-gepuffert und für die Verwendung in einem CO2-Inkubator ausgelegt, weshalb sein pH-Wert außerhalb eines CO2-Inkubators langsam ansteigt. Oftmals wird Ham’s F-10 und F-12 mit FCS ergänzt (2 – 20 % Volumenanteil, meist 10 % Volumenanteil), um Wachstumsfaktoren und Proteine zu ergänzen und so ein schnelleres Wachstum zu erreichen. Ham’s F-12 ist eine Weiterentwicklung von F-10 und enthält eine höhere Konzentration an Aminosäuren und Zinksulfat, darüber hinaus wurden Putrescin und (teilweise) Linolsäure hinzugefügt.[2] Zinksulfat ist nicht für Maus-L-Zellen geeignet.[2] Dadurch eignet es sich besser für die serumfreie Kultur von CHO-Zellen. Weiterhin existieren noch zwei Modifikationen von Ham’s F-12: Coon’s Modifikation[3] und Kaighn’s Modifikation.[2]
Ham’s F-12 Bearbeiten
Die Zusammensetzung von Ham’s F-12,[4] in Milligramm, auf 1 Liter mit bidestilliertem Wasser aufzufüllen und dann sterilzufiltrieren:
- L-Arginin 211 mg
- Biotin 0,024 mg
- L-Histidin 21 mg
- Calciumpantothenat 0,7 mg
- L-Lysin 29,3 mg
- Cholinchlorid 0,69 mg
- L-Methionin 4,48 mg
- i-Inositol 0,54 mg
- L-Phenylalanin 4,96 mg
- Niacinamid 0,6 mg
- L-Tryptophan 0,6 mg
- Pyridoxinhydrochlorid 0,2 mg
- L-Tyrosin 1,81 mg
- Riboflavin 0,37 mg
- L-Alanin 8,91 mg
- Thymidin 0,7 mg
- Glycin 7,51 mg
- Cyanocobalamin 1,3 mg
- L-Serin 10,5 mg
- Natriumpyruvat 110 mg
- L-Threonin 3,57 mg
- Liponsäure 0,2 mg
- L-Asparaginsäure 13,3 mg
- CaCl2 44 mg
- L-Glutaminsäure 14,7 mg
- MgSO4·7H2O 153 mg
- L-Asparagin 15 mg
- Glucose 1,1 g
- L-Glutamin 146,2 mg
- NaCl 7,4 g
- L-Isoleucin 2,6 mg
- KCl 285 mg
- L-Leucin 13,1 mg
- Na2HPO4 290 mg
- L-Prolin 11,5 mg
- KH2PO4 83 mg
- L-Valin 3,5 mg
- Phenolrot 1,2 mg
- L-Cystein 31,5 mg
- FeSO4 0,83 mg
- Thiaminhydrochlorid 1 mg
- CuSO4·5H2O 0.0025 mg
- Hypoxanthin 4 mg
- ZnSO4·7H2O 0.028 mg
- Folsäure 1,3 mg
- NaHCO3 1,2 g
Literatur Bearbeiten
- Gerhard Gstraunthaler, Toni Lindl: Zell- und Gewebekultur. 8. Auflage, Springer, 2021. doi:10.1007/978-3-662-62606-1.
- Cord C. Uphoff, Hans G. Drexler (auth.), Cheryl D. Helgason, Cindy L. Miller: Basic Cell Culture Protocols. In: Methods in Molecular Biology Band 946, Humana, 2013. ISBN 978-1-62703-128-8.
- Shalini Mani, Manisha Singh, Anil Kumar: Animal Cell Culture – Principles and Practice. In: Techniques in Life Science and Biomedicine for the Non-Expert. Springer, 2023. ISBN 978-3-031-19484-9.
Einzelnachweise Bearbeiten
- ↑ R. G. Ham: Clonal Growth of Mammalian Cells in a chemically defined, synthetic Medium. In: Proceedings of the National Academy of Sciences. Band 53, Nummer 2, Februar 1965, S. 288–293, doi:10.1073/pnas.53.2.288, PMID 14294058, PMC 219509 (freier Volltext).
- ↑ a b c d Sabine Schmitz: Der Experimentator: Zellkultur. 4. Auflage, Springer Spektrum, 2020. ISBN 978-3-662-58951-9. S. 147.
- ↑ H. G. Coon, M. C. Weiss: A quantitative comparison of formation of spontaneous and virus-produced viable hybrids. In: Proceedings of the National Academy of Sciences. Band 62, Nummer 3, März 1969, S. 852–859, doi:10.1073/pnas.62.3.852, PMID 4308097, PMC 223676 (freier Volltext).
- ↑ Manjula Shenoy: Animal Biotechnology. Firewall Media, 2007, ISBN 978-81-318-0108-6, S. 19–20 (englisch, google.com).