rxYFP (Abkürzung für englisch Redox-sensitive YFP) ist eine veränderte Variante des grün fluoreszierenden Proteins, bei der sich die Fluoreszenz redox-abhängig ändert.[1][2]

GFP aus Aequorea victoria, Wildtyp-Form.

Eigenschaften

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rxYFP besitzt im Vergleich zur Wildtyp-Form des GFP zwei oxidierbare Cysteine. Durch Oxidation der Thiolgruppen der Cysteine wird Cystin gebildet, was sich in einer Minderung der Fluoreszenz des rxYFP auswirkt.

Anwendungen

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Das rxYFP wird unter anderem als redox-abhängiger Biosensor und als Reporterprotein verwendet. Mit rxYFP kann das Redox-Potential und die Menge an Glutathion im Zytosol oder im Zellkern in vivo bestimmt werden.[3][4]

Alternative optische Nachweisverfahren verwenden z. B. Resazurin (synonym AlamarBlue), Dichlorofluorescein (DCF) oder die Proteine HyPer oder roGFP.[5]

Einzelnachweise

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  1. H. Østergaard, C. Tachibana, J. R. Winther: Monitoring disulfide bond formation in the eukaryotic cytosol. In: The Journal of Cell Biology. Band 166, Nummer 3, August 2004, S. 337–345, ISSN 0021-9525. doi:10.1083/jcb.200402120. PMID 15277542. PMC 2172265 (freier Volltext).
  2. K. A. Lukyanov, V. V. Belousov: Genetically encoded fluorescent redox sensors. In: Biochimica et Biophysica Acta. Band 1840, Nummer 2, Februar 2014, S. 745–756, ISSN 0006-3002. doi:10.1016/j.bbagen.2013.05.030 (freier Volltext). PMID 23726987.
  3. M. Dardalhon, C. Kumar, I. Iraqui, L. Vernis, G. Kienda, A. Banach-Latapy, T. He, R. Chanet, G. Faye, C. E. Outten, M. E. Huang: Redox-sensitive YFP sensors monitor dynamic nuclear and cytosolic glutathione redox changes. In: Free radical biology & medicine. Band 52, Nummer 11–12, 2012 Jun 1-15, S. 2254–2265, ISSN 1873-4596. doi:10.1016/j.freeradbiomed.2012.04.004. PMID 22561702. PMC 3382975 (freier Volltext).
  4. A. Banach-Latapy, T. He, M. Dardalhon, L. Vernis, R. Chanet, M. E. Huang: Redox-sensitive YFP sensors for monitoring dynamic compartment-specific glutathione redox state. In: Free Radical Biology and Medicine. Band 65, Dezember 2013, S. 436–445, ISSN 1873-4596. doi:10.1016/j.freeradbiomed.2013.07.033. PMID 23891676.
  5. S. Pouvreau: Genetically encoded reactive oxygen species (ROS) and redox indicators. In: Biotechnology journal. Band 9, Nummer 2, Februar 2014, S. 282–293, ISSN 1860-7314. doi:10.1002/biot.201300199. PMID 24497389.