Diskussion:Bimolekulare Fluoreszenzkomplementation

Stabile Komplexe

Hallo Sven, bezüglich des Satzes: Da einmal gebildete BiFC-Komplexe stabil sind, lassen sich auch zeitlich kurze Interaktionen der untersuchten Proteine nachweisen. Primär weiß ich das mal aus Diskussionen in unserem Journal Club. Auf die Schnelle habe ich folgende Aussage gefunden: In addition, formation of some bimolecular fluorescent complexes is irreversible at least in vitro (44). und zwar hier: Kerppola TK: Bimolecular fluorescence complementation (BiFC) analysis as a probe of protein interactions in living cells. In: Annual review of biophysics. 37. Jahrgang, 2008, S. 465–87, doi:10.1146/annurev.biophys.37.032807.125842, PMID 18573091. . Die dort zitierte Arbeit (44) ist diese: Hu CD, Chinenov Y, Kerppola TK: Visualization of interactions among bZIP and Rel family proteins in living cells using bimolecular fluorescence complementation. In: Molecular cell. 9. Jahrgang, Nr. 4, April 2002, S. 789–98, PMID 11983170 (elsevier.com). . In der ersten genannten Arbeit heist es an späterer Stelle noch: The interaction partners do not need to form a complex with a long half-life because transient interactions can be trapped by the association of the fluorescent protein fragments. Ich denke das sollte reichen als Quelle, ich nehme den Satz daher wieder rein, einverstanden? -- Dietzel65 16:30, 2. Nov. 2008 (CET)

Hallo Dietzel. In der Tat, Thomas Kerppola hat diese (zugegeben etwas vage) Formulierung in einigen seiner Reviews drin (siehe auch Kerppola TK (2006). Nat. Protoc. 1:1278-1286). Die Tatsache, dass BiFC mit transient interagierenden Proteinen der Signaltransduktionskaskaden interagiert mag das zusätzlich stützen (z.B. Remy I et al. (2004). Nat. Cell Biol. 6:358-365). Andererseits lässt die langsame Kinetik der Komplementation (t1/2 = 60 s, Kerppola TK (2006). Nat. Methods 3:969-971) vermuten, warum vor allem konstitutive Interaktionen (z.B. Mervine SM et al. (2006). Mol. Pharmacol. 70:194-205) mittels BiFC erfolgreich nachgewiesen wurden. Anyway, lassen wir es drin. Ich würde dann aber noch anmerken, dass BiFC keine temporale Auflösung bietet (welch Wunder). --Svеn Jähnісhеn 17:42, 2. Nov. 2008 (CET)

Protein

habe letzte Änderung gerade rückgängig gemacht: Klar sind das Proteine! -- d65_{sag's mir} 17:39, 26. Jan. 2009 (CET)