Calf-Intestinal-Phosphatase
Bei der Calf Intestinal Phosphatase (CIP) handelt es sich um eine Alkalische Phosphatase, ein in der Molekularbiologie gebräuchliches Enzym, welches die Hydrolyse freier Phosphatgruppen von biologischen Makromolekülen katalysiert. Gemäß seiner Bezeichnung wurde es zuerst aus dem Darminhalt von Kälbern isoliert. Die Calf Intestine Phosphatase dephosphoryliert vorwiegend DNA, RNA und Proteine und bevorzugt ein leicht alkalisches Milieu als Reaktionsmedium.
| Calf-Intestinal-Phosphatase | ||
|---|---|---|
| Masse/Länge Primärstruktur | 533 Aminosäuren, 57.100 Da | |
| Sekundär- bis Quartärstruktur | Homodimer | |
| Kofaktor | Magnesium, Zink | |
| Bezeichner | ||
| Gen-Name(n) | IAP | |
| Externe IDs | ||
| Enzymklassifikation | ||
| EC, Kategorie | 3.1.3.1, Phosphatase | |
| Reaktionsart | Hydrolyse von Phosphatgruppen (Phosphorsäure-Estern) | |
| Substrat | Phosphorsäuremonoester + H2O | |
| Produkte | Phosphat + Alkohol | |
| Vorkommen | ||
| Homologie-Familie | Alkaline Phosphatase | |
| Übergeordnetes Taxon | Bos taurus | |
Anwendungen
BearbeitenIn der Biochemie und Molekularbiologie wird sie insbesondere beim Klonieren von Plasmid-DNA zur Vermeidung einer Selbstligation nach einem Schnitt mit Restriktionsenzymen eingesetzt. Als Alternative findet die durch Erhitzen denaturierbare Shrimp Alkaline Phosphatase und die antarktische Phosphatase Anwendung.
Literatur
Bearbeiten- Sambrook, J.; Maniatis, T.; Russel, D.W.: Molecular cloning: a laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press; 3rd edition (2001) ISBN 0-87969-577-3